
變異鏈球菌的液體培養(yǎng)常規(guī)孵育時(shí)間為 24~48 小時(shí),核心培養(yǎng)條件為37℃、5% CO?的微需氧 / 兼性厭氧環(huán)境,不同培養(yǎng)目的和培養(yǎng)基選擇會(huì)讓培養(yǎng)時(shí)間略有調(diào)整,具體分常規(guī)培養(yǎng)和專項(xiàng)檢測兩類:
常規(guī)增菌 / 生長觀察(最常用)
采用 BHI 肉湯(腦心浸液肉湯)、THB 肉湯等專用培養(yǎng)基,37℃+5% CO?培養(yǎng)24 小時(shí)即可達(dá)到對數(shù)生長期,菌液濃度滿足常規(guī)的菌數(shù)計(jì)數(shù)、形態(tài)觀察、生化鑒定等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)需求;若需獲得更高濃度的菌液(如制備菌懸液、提取菌體成分),可延長至48 小時(shí)(穩(wěn)定期),此時(shí)菌體量達(dá)到峰值。
專項(xiàng)檢測 / 特殊實(shí)驗(yàn)
若用于產(chǎn)酸能力、生物膜形成、毒力因子表達(dá)等功能實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)時(shí)間會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整:比如生物膜體外培養(yǎng)需48~72 小時(shí),才能形成穩(wěn)定的生物膜結(jié)構(gòu);產(chǎn)酸特性檢測一般在 24 小時(shí)基礎(chǔ)上,繼續(xù)孵育至 48 小時(shí)以觀察 pH 值的動(dòng)態(tài)變化。
補(bǔ)充注意:變異鏈球菌為兼性厭氧菌,液體培養(yǎng)時(shí)需避免劇烈振蕩和過度通氧,培養(yǎng)基可輕微靜置或采用厭氧罐孵育,24 小時(shí)后可通過菌液的渾濁度初步判斷生長情況(陽性為菌液變渾濁),48 小時(shí)生長結(jié)果更穩(wěn)定,極少需要超過 72 小時(shí)的培養(yǎng)(易出現(xiàn)雜菌污染或菌體自溶)。
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